现已开发出了多种酵母细胞转化方法(图1)。4, 5常用的酵母细胞转化方法包括锂、电穿孔、基因枪和玻璃珠方法。这些方法常用于酿酒酵母,但也可用于其他真菌转化,如酵母(例如粟酒裂殖酵母、白色念珠菌和毕赤酵母)和丝状真菌(例如曲霉属菌种)。
要求转化方法涉及三个主要步骤:
制备感受态酵母细胞用质粒DNA转化后续接种以筛选转化体。审核所需材料和详细的转化实验方案。
应用转化已在分子生物学领域广泛应用。酵母转化的常见用途如下:
酵母转化体可进一步用于细胞裂解和质粒制备用途。从转化体获得的质粒DNA继续用作PCR模板,或用于转化大肠杆菌。酵母转化体用于酵母双杂交系统,以研究蛋白质-蛋白质或蛋白质-DNA的相互作用。酵母转化技术也可用于蛋白质和酶的商业化生产。此外,它们还可用于食品工业和工厂废物处理系统。酵母表达系统可合成和分泌人蛋白质(如白细胞介素-1β),在制药行业制剂方面可能蕴含着巨大的潜能。转化效率计算不同菌种的酵母具有不同的效率。6转化效率指的是转化反应中每μg超螺旋质粒DNA产生的转化体数量。7大多数转化实验方案适用于面包酵母、酿酒酵母,可能并不适用于其他菌种。